肝脏作为药物代谢的重要器官，在药物的处理和潜在毒性中扮演着关键角色。原代肝细胞（Primary Hepatocytes）因其拥有完整的细胞特性、丰富的代谢酶和辅助因子，如细胞色素P450（Cytochrome P450）和胞质酯酶，被广泛视为建立体外肝脏模型的金标准。这些细胞在药物相互作用、药物代谢及其毒性研究中深受研究者关注。本文将概述基于原代肝细胞的二维（2D）和三维（3D）培养模型，以及它们在药物研发中的应用。

### 一、原代肝细胞的分离

常用的原代肝细胞分离方法为两步胶原酶灌注。小动物通常通过门静脉或下腔静脉进行肝脏灌注，而大动物则采用肝叶或肝节段灌注。成功分离肝细胞的关键因素包括：第一，使用无细胞毒性的胶原酶；第二，恰当的消化时机以避免细胞损伤；第三，维持良好的肝脏状态以降低缺血性损伤风险。原代肝细胞的研究标准包括：开始时活率需达到80%，且在实验过程中活率下降必须控制在20%以内。

### 二、原代肝细胞的2D培养

悬浮肝细胞模型保留了完整的药物代谢活性，但随着孵育时间的延长，细胞活率及酶活性会降低，通常限制在4小时以内。对于代谢缓慢的化合物，采用悬浮肝细胞接力法可延长孵育时间以提高准确性。贴壁肝细胞的2D培养容易受到细胞极性和功能改变的影响，且缺少所需的其他类型细胞，这可能限制其在药物相互作用和肝毒性评估中的应用。

### 三、三维（3D）培养模型的优势

球状体模型使原代肝细胞能够以更自然的形式聚集，模拟体内环境。与传统的2D培养相比，3D培养有助于维持肝细胞的活力和功能，适合用于药物代谢和肝细胞毒性研究。肝类器官模型则通过从干细胞或组织来源细胞发展而来，可以更为真实地再现肝脏的生物学特性和微环境，为肝病及药物开发提供了新的研究平台。

### 四、共培养模型的应用

原代肝细胞的共培养模型通过将两种或多种不同细胞混合在一起，在2D或3D环境中培养，能维持肝细胞的药物代谢功能，并为研究肝炎、肝纤维化等疾病提供了新思路。以原代肝细胞和成纤维细胞共培养为例，能够有效探讨慢代谢化合物的清除率及其代谢产物。

综上所述，随着生物医学领域的不断发展，北国在原代肝细胞的研究与开发中积极探索，助力药物开发与相关疾病研究。我们致力于为市场提供高品质研究产品，推动生物医学进步。人生就是博-尊龙凯时，期待与您共同探索创新之路。