产品及特点

本产品是一款基于探针法荧光定量PCR原理开发的检测试剂盒，具有以下特点：

1. 即开即用

用户只需提供样品DNA模板，操作简单快捷。

2. 高灵敏度

引物及其他组分经过优化，能够实现高灵敏度的检测。

3. 提供阳性对照

配备阳性对照，方便用户辨别假阴性样品。

4. 高特异性

引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列高度保守区域，确保不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

5. 定性与定量检测

该产品可用于定性检测，也可用于定量检测，定量检测时线性范围至少达到5个数量级。

6. 足够的使用次数

本产品可以完成50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 科研专用

本产品仅限科研使用。

操作方法

一、DNA提取（样本制备区）

用户可以使用自选的方法提取纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

为了避免污染样品或其他试剂，请在独立区域进行稀释操作。

1. 标记6个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。
2. 用带芯枪头加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10⁸拷贝/μL的阳性对照，充分震荡后得到1×10⁷拷贝/μL的标准样品，放冰上待用。
4. 依次换枪头，将阳性对照逐步稀释，并放冰备用，直至得到6个不同稀释度的标准样品。
5. 若不需制作标准曲线，则可将阳性对照稀释至1×10⁵拷贝/μL。

三、试剂配制（试剂准备区）

根据待检样品数量准备相应数量的qPCR管，向各管中加入相应成分（详见说明书）。

四、添加模板（模板添加区）

向qPCR管中添加2μL模板，按照阴性对照、待测样品、阳性对照的顺序，离心30秒后立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管置于PCR扩增仪器中，按照规定扩增程序进行操作（详见说明书）。

六、结果分析

进行标准曲线时，以阳性对照浓度的log值为横轴，以Ct值为纵轴绘制曲线，进而推算样品DNA浓度。未制作标准曲线的样品判定标准为：

• 阳性对照：Ct值<30，并呈现明显的S型曲线。
• 阴性对照：Ct值38或无Ct值。
• 样本检测：Ct值<35为阳性，Ct值38或无Ct值为阴性，35-38需复检。

运输及保存：需低温运输，保存于-20℃，保质期为一年。阳性对照需单独存放，避免污染其他试剂。

人生就是博-尊龙凯时，我们的品牌致力于提供高质量的生物医疗产品，助力科研进步与技术创新。