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实时荧光定量PCR操作与注意事项 - 人生就是博-尊龙凯时

来源:曹秋柔 日期:2025-03-07

实时荧光定量PCR操作流程概述

本文将介绍基于SYBR染料法和Taqman探针法的qPCR反应体系的操作流程。以Vazyme的ChamQ™ Universal SYBR® qPCR Master Mix(Vazyme#Q711)和AceQ® Universal U+ Probe Master Mix V2(Vazyme#Q513)为例,详细说明相关步骤和材料准备。

实时荧光定量PCR操作与注意事项 - 人生就是博-尊龙凯时

基于SYBR染料法的qPCR反应体系

所需组分包括自备的ddH2O、15ml离心管及放置qPCR管的冰块或移动冰盒。以下是操作流程(以ABI StepOnePlus™为测试机型):

  • 准备反应体系所需的各个成分。
  • 在qPCR管中加入所需的DNA模板、引物以及SYBR染料。
  • 根据实验要求设定PCR循环条件。
  • 运行qPCR仪器并记录数据。

基于Taqman探针法的qPCR反应体系

同样所需组分包括ddH2O、15ml离心管、qPCR管的冰块或移动冰盒。操作流程(以ABI StepOnePlus™为测试机型)如下:

  • 准确称量并准备各反应组分。
  • 在qPCR管中添加DNA模板、Taqman探针及其他试剂。
  • 设置合适的PCR程序并进行实验。
  • 完成后,分析和解释实验结果。

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